{"id":2002,"date":"2021-11-15T08:00:37","date_gmt":"2021-11-15T11:00:37","guid":{"rendered":"https:\/\/www.labguemes.com.ar\/web\/?p=2002"},"modified":"2022-02-02T09:42:18","modified_gmt":"2022-02-02T12:42:18","slug":"evaluacion-de-la-fragmentacion-del-dna-espermatico-mediante-el-test-de-tunel","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.labguemes.com.ar\/web\/evaluacion-de-la-fragmentacion-del-dna-espermatico-mediante-el-test-de-tunel\/","title":{"rendered":"Evaluaci\u00f3n de la Fragmentaci\u00f3n del DNA Esperm\u00e1tico mediante el Test de Tunel"},"content":{"rendered":"

ASPECTOS CLINICOS:<\/strong>
\nCada vez m\u00e1s, la integridad del DNA esperm\u00e1tico es reconocida como una medida independiente de su calidad y se sabe que es de\u00a0vital importancia en el inicio y mantenimiento de un embarazo a t\u00e9rmino tanto in vivo como in vitro.
\nEl an\u00e1lisis del semen en el que se miden concentraci\u00f3n, ph, volumen, movilidad y normalidad morfol\u00f3gica de los espermatozoides,\u00a0contin\u00faa siendo la prueba cl\u00ednica m\u00e1s importante para predecir infertilidad, sin embargo, no revela defectos en el espermatozoide\u00a0que afecten a la integridad del genoma masculino. Por lo tanto, la evaluaci\u00f3n del mismo, adem\u00e1s del estudio de los par\u00e1metros\u00a0sistem\u00e1ticos seminales, podr\u00eda aportar una informaci\u00f3n adicional acerca de la calidad del espermatozoide.
\nNormalmente, el da\u00f1o al DNA puede ser reparado por el ovocito despu\u00e9s de la fertilizaci\u00f3n. \u00c9sto depende principalmente de la\u00a0calidad citoplasm\u00e1tica y genot\u00edpica del \u00f3vulo, y del nivel de da\u00f1o en las cadenas de DNA del espermatozoide que produjo la fertilizaci\u00f3n.<\/p>\n

\u00bfQU\u00c9 ES EL DNA ESPERM\u00c1TICO NORMAL?<\/strong>
\nEl DNA esperm\u00e1tico esta organizado de forma tal que mantiene la cromatina compacta y estable. Esta organizaci\u00f3n no solo permite\u00a0que se encuentre muy bien empaquetado el material gen\u00e9tico para ser transferido al huevo, sino que asegura que sea entregado en\u00a0forma f\u00edsica y qu\u00edmica tal, que contribuya al desarrollo del embri\u00f3n haciendo m\u00e1s accesible la informaci\u00f3n gen\u00e9tica. El espermatozoide\u00a0f\u00e9rtil tiene un DNA estable, el cual es capaz de descondensarse en el momento apropiado del proceso de la fertilizaci\u00f3n y\u00a0transmitir el DNA sin defectos.<\/p>\n

ORIGEN DEL DA\u00d1O AL DNA DE ESPERMATOZOIDES<\/strong>
\nEl origen de las lesiones en el DNA del espermatozoide puede deberse a m\u00faltiples causas de tipo intr\u00ednseco o inducidas por factores\u00a0externos.
\nLos factores intr\u00ednsecos incluyen:
\n\u2022 Selecci\u00f3n ineficiente: La producci\u00f3n de espermatozoides se localiza en los t\u00fabulos semin\u00edferos (test\u00edculos) y en algunos casos los\u00a0espermatozoides y sus c\u00e9lulas progenitoras sufren alteraciones de tipo gen\u00e9tico que resultan en roturas del DNA. Estos espermatozoides\u00a0da\u00f1ados son generalmente seleccionados y eliminados, pero si el mecanismo de selecci\u00f3n falla aparecen espermatozoides\u00a0con el DNA fragmentado en el eyaculado.
\n\u2022 Maduraci\u00f3n incorrecta: Los espermatozoides sufren un proceso de maduraci\u00f3n en epid\u00eddimo. Este proceso de maduraci\u00f3n
\nconlleva al empaquetamiento de la cromatina nuclear y la adquisici\u00f3n de la motilidad esperm\u00e1tica. Si este proceso no se lleva a\u00a0cabo correctamente se pueden producir lesiones en el DNA esperm\u00e1tico.
\nLos factores externos incluyen:
\n\u2022 Da\u00f1o inducido por radio\/quimioterapia.
\n\u2022 Varicocele.
\n\u2022 Episodio de fiebre alta.
\n\u2022 Exposici\u00f3n a elevadas temperaturas.
\n\u2022 Enfermedad inflamatoria aguda o cr\u00f3nica.
\n\u2022 El estr\u00e9s oxidativo post testicular: Durante el transporte de los espermatozoides a trav\u00e9s del epid\u00eddimo se puede producir
\nfragmentaci\u00f3n del DNA esperm\u00e1tico. Uno de los mecanismos principales es el relacionado con la producci\u00f3n de radicales libres,\u00a0ya sea por espermatozoides inmaduros o por las c\u00e9lulas epiteliales del epid\u00eddimo, que da\u00f1an directamente el material gen\u00e9tico\u00a0del espermatozoide. Adem\u00e1s, la activaci\u00f3n de caspasas y endonucleasas esperm\u00e1ticas por factores t\u00f3xicos y temperaturas elevadas\u00a0tambi\u00e9n puede inducir fragmentaci\u00f3n del DNA.<\/p>\n

M\u00c9TODOS PARA EVALUAR LA FRAGMENTACI\u00d3N DEL DNA<\/strong>
\nPor varios a\u00f1os los investigadores han buscado la mejor forma de cuantificar el da\u00f1o presente en el DNA de espermatozoides humanos.\u00a0Actualmente se dispone de varias t\u00e9cnicas que miden el da\u00f1o al DNA en los mismos. Algunas eval\u00faan la integridad del DNA y\u00a0otros ensayos identifican defectos en el empaquetamiento de la cromatina esperm\u00e1tica.
\nEn nuestro laboratorio comenzamos a utilizar el Test de TUNEL (Terminal desox\u00ed nucleotidil Uridin trifosfato, dUPT , deoxynucleotidiltranferase Nick-End Labelling assay), que es el test recomendado por lideres de opini\u00f3n en estudios de fragmentacion de DNA.
\nActualmente el valor de corte recomendado para este Test es del < 15 % o 30 %, seg\u00fan la metodolog\u00eda empleada.
\nEsta prueba permite visualizar la incorporaci\u00f3n de nucleotidos marcados en los extremos de las roturas existentes en el DNA, bien\u00a0sean de cadena simple o doble. La reacci\u00f3n se cataliza, in situ, mediante la acci\u00f3n de una tranferasa Terminal. Esta enzima incorpora\u00a0deoxiuridina modificada con biotina o digoxigenina, en el extremo 3\u2019-OH de la cadena afectada. El nucle\u00f3tido incorporado esta\u00a0directamente marcado con un fluorocromo. Te\u00f3ricamente la se\u00f1al de marcado obtenida por cada espermatozoide, se incrementar\u00eda\u00a0de acuerdo con el n\u00famero de roturas que presente la cadena de DNA.<\/p>\n

Esta t\u00e9cnica ha tenido una muy buena aceptaci\u00f3n dado que es vers\u00e1til, est\u00e1 comercializada en kit y los resultados pueden ser\u00a0interpretados mediante microscopia de fluorescencia y citometria de flujo.<\/p>\n

UTILIDAD CLINICA<\/strong>
\nEste Test se recomienda el los siguientes casos:
\n\u2022 Infertilidad idiop\u00e1tica (de causa desconocida).
\n\u2022 Tras fallos repetidos en t\u00e9cnicas de reproducci\u00f3n asistida.
\n\u2022 Casos en los que se ha observado una mala calidad embrionaria.
\n\u2022 Pacientes que han sufrido abortos de repetici\u00f3n.
\n\u2022 Varicocele.
\n\u2022 Varones inf\u00e9rtiles con edades superiores a los 40 a\u00f1os.
\n\u2022 Casos de congelaci\u00f3n de semen (se comprueba que la muestra congelada tenga unos niveles de fragmentaci\u00f3n aceptables).
\n\u2022 Episodio febril en los \u00faltimos 3 meses.<\/p>\n

Los tipos de muestra que se emplean son semen eyaculado, semen post selecci\u00f3n esperm\u00e1tica, espermatozoides obtenidos por\u00a0punci\u00f3n esperm\u00e1tica o biopsia (TESA, TESE, MESA). Para la muestra de semen, el paciente deber\u00e1 solicitar turno e indicaciones de\u00a0preparaci\u00f3n al laboratorio y para las muestras derivadas, remitir un volumen aproximado de 1,0 ml de semen entero homogeneizado\u00a0dentro de las 2 horas de obtenido.<\/p>\n

CONCLUSIONES<\/strong>
\nLa evidencia en la literatura muestra que el da\u00f1o al DNA influye en la fertilidad de las parejas. Si el espermatozoide con lesiones en el\u00a0DNA fertiliza un \u00f3vulo y origina un nacimiento, es posible que se produzca una anomal\u00eda cong\u00e9nita. Por lo tanto, se debe estudiar el\u00a0da\u00f1o al DNA en pacientes inf\u00e9rtiles. El estudio del DNA esperm\u00e1tico puede ayudar en la selecci\u00f3n de espermatozoides con la menor\u00a0cantidad de da\u00f1o para su uso en la concepci\u00f3n asistida.
\nLos resultados del estudio de fragmentaci\u00f3n del DNA ayudar\u00edan al m\u00e9dico en la evaluaci\u00f3n, y proporcionar\u00edan mejor consejo a las\u00a0parejas inf\u00e9rtiles en relaci\u00f3n con sus posibilidades de lograr una gestaci\u00f3n a termino y obtener un ni\u00f1o sin alteraciones. Esto puede\u00a0aliviar los problemas emocionales y sociales asociados con los intentos fallidos en las t\u00e9cnicas de reproducci\u00f3n asistida. Estas t\u00e9cnicas\u00a0tambi\u00e9n podr\u00edan tener efectos positivos en la disminuci\u00f3n de la mortalidad infantil en reci\u00e9n nacidos y en ni\u00f1os menores de 5\u00a0a\u00f1os.<\/p>\n

Fuente: www.iaca.com.ar<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

ASPECTOS CLINICOS: Cada vez m\u00e1s, la integridad del DNA esperm\u00e1tico es reconocida como una medida independiente de su calidad y se sabe que es de\u00a0vital importancia en el inicio y mantenimiento de un embarazo a t\u00e9rmino tanto in vivo como in vitro. El an\u00e1lisis del semen en el que se miden concentraci\u00f3n, ph, volumen, movilidad y normalidad morfol\u00f3gica de los espermatozoides,\u00a0contin\u00faa siendo la prueba cl\u00ednica m\u00e1s importante para predecir infertilidad, sin embargo, no revela defectos en el espermatozoide\u00a0que afecten a la integridad del genoma masculino. Por lo tanto, la evaluaci\u00f3n del mismo, adem\u00e1s del estudio de los par\u00e1metros\u00a0sistem\u00e1ticos seminales, podr\u00eda aportar una informaci\u00f3n adicional acerca de la calidad del espermatozoide. Normalmente, el da\u00f1o al DNA puede ser reparado por el ovocito despu\u00e9s de la fertilizaci\u00f3n. \u00c9sto depende principalmente de la\u00a0calidad citoplasm\u00e1tica y genot\u00edpica del \u00f3vulo, y del nivel de da\u00f1o en las cadenas de DNA del espermatozoide que produjo la fertilizaci\u00f3n. \u00bfQU\u00c9 ES EL DNA ESPERM\u00c1TICO NORMAL? El DNA esperm\u00e1tico esta organizado de forma tal que mantiene la cromatina compacta y estable. Esta organizaci\u00f3n no solo permite\u00a0que se encuentre muy bien empaquetado el material gen\u00e9tico para ser transferido al huevo, sino que asegura que sea entregado en\u00a0forma f\u00edsica y qu\u00edmica tal, que contribuya al desarrollo del embri\u00f3n haciendo m\u00e1s accesible la informaci\u00f3n gen\u00e9tica. El espermatozoide\u00a0f\u00e9rtil tiene un DNA estable, el cual es capaz de descondensarse en el momento apropiado del proceso de la fertilizaci\u00f3n y\u00a0transmitir el DNA sin defectos. ORIGEN DEL DA\u00d1O AL DNA DE ESPERMATOZOIDES El origen de las lesiones en el DNA del espermatozoide puede deberse a m\u00faltiples causas de tipo intr\u00ednseco o inducidas por factores\u00a0externos. Los factores intr\u00ednsecos incluyen: \u2022 Selecci\u00f3n ineficiente: La producci\u00f3n de espermatozoides se localiza en los t\u00fabulos semin\u00edferos (test\u00edculos) y en algunos casos los\u00a0espermatozoides y sus c\u00e9lulas progenitoras sufren alteraciones de tipo gen\u00e9tico que resultan en roturas del DNA. Estos espermatozoides\u00a0da\u00f1ados son generalmente seleccionados y eliminados, pero si el mecanismo de selecci\u00f3n falla aparecen espermatozoides\u00a0con el DNA fragmentado en el eyaculado. \u2022 Maduraci\u00f3n incorrecta: Los espermatozoides sufren un proceso de maduraci\u00f3n en epid\u00eddimo. Este proceso de maduraci\u00f3n conlleva al empaquetamiento de la cromatina nuclear y la adquisici\u00f3n de la motilidad esperm\u00e1tica. Si este proceso no se lleva a\u00a0cabo correctamente se pueden producir lesiones en el DNA esperm\u00e1tico. Los factores externos incluyen: \u2022 Da\u00f1o inducido por radio\/quimioterapia. \u2022 Varicocele. \u2022 Episodio de fiebre alta. \u2022 Exposici\u00f3n a elevadas temperaturas. \u2022 Enfermedad inflamatoria aguda o cr\u00f3nica. \u2022 El estr\u00e9s oxidativo post testicular: Durante el transporte de los espermatozoides a trav\u00e9s del epid\u00eddimo se puede producir fragmentaci\u00f3n del DNA esperm\u00e1tico. Uno de los mecanismos principales es el relacionado con la producci\u00f3n de radicales libres,\u00a0ya sea por espermatozoides inmaduros o por las c\u00e9lulas epiteliales del epid\u00eddimo, que da\u00f1an directamente el material gen\u00e9tico\u00a0del espermatozoide. Adem\u00e1s, la activaci\u00f3n de caspasas y endonucleasas esperm\u00e1ticas por factores t\u00f3xicos y temperaturas elevadas\u00a0tambi\u00e9n puede inducir fragmentaci\u00f3n del DNA. 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